細胞長得慢、傳代不易貼壁，該怎麽挽救？

　　各類細胞產(chan) 品是我們(men) 做實驗研究的基礎，一支小小的細胞，關(guan) 乎我們(men) 各種實驗的成功與(yu) 否，細胞的”小事情“，在實驗中都是”大事情“，如果你的細胞出現生長緩慢、不貼壁等情況，那你可要注意了，這就是細胞狀態不好的信號，要及時“挽救”，不然很有可能細胞就瀕臨(lin) 死亡。

　　問題一：細胞生長緩慢

　　細胞長得慢是細胞培養(yang) 過程中比較常見的問題，一般來說，細胞活力和濃度一直是細胞健康的標誌，細胞長得慢的話，活力和濃度可能都會(hui) 直線下降。

　　造成細胞生長緩慢的主要原因及解決(jue) 方法：

　　1，新配置的培養(yang) 基以及換了新的血清，細胞不適應;

　　解決(jue) 方法：最好使用最適宜的培養(yang) 基，如果條件不允許，可以換液時不要全量換液逐漸增加新的培養(yang) 基比例，1/4、1/2、3/4到1，多傳(chuan) 代幾次，讓細胞慢慢適應。

　　2，細胞密度不夠

　　有些細胞是細胞依賴性細胞，密度過低生長緩慢;也可能是細胞分泌促生長活性物質過少，細胞連接不好等原因。

　　解決(jue) 辦法：增加細胞接種密度;將細胞從(cong) 大皿轉移至小皿培養(yang) ;適當增加培養(yang) 基血清濃度。

　　3，培養(yang) 環境改變

　　細胞培養(yang) 箱的溫度、CO2、細胞的生存環境要適宜，一般來說最佳溫度:是37 ℃， CO2:濃度為(wei) 5% ， pH:為(wei) 7.2-7.4，還有滲透壓等，大家要注意調好，不要隨意改變。

　　4，汙染，如支原體(ti) ，細菌，真菌等

　　解決(jue) 辦法：細胞汙染是多方麵的原因，一方麵要嚴(yan) 格無菌操作技術、保持清潔的環境，另一方麵，汙染之後要及時鑒別和處理，並且，建議大家使用品質良好的細胞株和培養(yang) 基，這是是減少汙染的最好方法。

　　5，細胞本身狀態改變，如衰老等

　　解決(jue) 辦法：沒有可逆的辦法，隻能及時更換新的細胞。

　　當然如果培養(yang) 細胞是原代的話，生長速度是比較緩慢的，如果沒有及時換液，營養(yang) 成分不夠，細胞也會(hui) 生長緩慢。用螺旋口瓶培養(yang) 細胞時，需將瓶蓋微鬆，以保證通氣，要保持培養(yang) 箱內(nei) 空氣幹淨等。

　　其實隻要條件適於(yu) 細胞生長，細胞在自己的“小房子”裏麵舒適自由，那麽(me) ，它一定會(hui) 長得很快，並且，形態越來越“漂亮”。

　　問題二：細胞不貼壁

　　一般來說，正常情況下，細胞培養(yang) 一段時間後，正常生長的小細胞們(men) 貼在壁上，優(you) 哉遊哉地享受生活，而沒能存活的細胞和其他種類的細胞則可能懸浮在上，如果你的細胞不貼壁，極有可能是沒有存活下來。

　　細胞不貼壁可能原因及解決(jue) 辦法：

　　1，胰酶消化過度；解決(jue) 方法：適當縮短胰酶消化時間或降低胰酶濃度。

　　2，支原體(ti) 汙染；解決(jue) 方法：分離培養(yang) 物，檢測支原體(ti) 。清潔支架和培養(yang) 箱。如發現支原體(ti) 汙染，丟(diu) 棄培養(yang) 物。

　　3，培養(yang) 瓶瓶底不幹淨；解決(jue) 方法：換用新的培養(yang) 皿或者培養(yang) 瓶。

　　4，消化液或培養(yang) 液配製錯誤、過期儲(chu) 存、儲(chu) 存不當；解決(jue) 方法：重新配置消化液或培養(yang) 液

　　5，細胞老化；解決(jue) 方法：同樣，沒有可逆的辦法，隻能及時更換新的細胞。

　　6，接種細胞起始濃度太低或太高；解決(jue) 方法：根據細胞特性接種適量的細胞。

　　總之，養(yang) 細胞需要耐心，要溫柔，要不然她真的會(hui) 給你顏色看哦。上文也提到了，使用品質良好的細胞株和培養(yang) 基是減少汙染的最好方法，同時也是保證細胞生長良好的前提。

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