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凡混入細胞培養(yang) 環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為(wei) 細胞汙染，細胞汙染不能*被消除，但能減少其發生的頻率和後果的嚴(yan) 重性。
本文將簡要介紹幾種常見的細胞汙染類型及處理方法。
常見細胞汙染類型
細胞細菌汙染
特征：大小在0.5~5 μm，比動物細胞小很多。多呈球狀或杆狀，形態規則，分布均勻；增殖速度快，一般細菌汙染後48~72小時爆發式增殖；營養(yang) 消耗快，培養(yang) 基很快變黃，變渾濁；鏡下觀察有明顯的定向運動。
處理方法：輕度細菌汙染可用10X雙抗清洗處理，重度細菌汙染建議消殺後丟(diu) 棄。
細胞真菌汙染
特征：細胞真菌汙染呈鏈球狀或絲(si) 狀。常形成肉眼可見的菌落，培養(yang) 基顏色無變化或變紫，僅(jin) 對局部細胞影響較大，其他地方生長正常。會(hui) 形成孢子，容易汙染其他細胞。
處理方法：細胞真菌汙染較難*，不建議保留，建議消殺後丟(diu) 棄。
細胞支原體(ti) 汙染
特征：最小的微生物，無法通過光學顯微鏡看見，但可通過電鏡觀察到。感染支原體(ti) 的細胞，在某一時間點碎片突然增多，隨著傳(chuan) 代，細胞狀態顯著變差。細胞支原體(ti) 汙染可通過氣溶膠傳(chuan) 播，影響同一細胞房其他細胞。
鑒定方法：PCR法、顯色法、熒光染色法等。
處理方法：若細胞汙染後狀態尚可，添加支原體(ti) 抑製劑培養(yang) 2-3代可轉陰；若細胞汙染後狀態很差，建議消殺後丟(diu) 棄。
黑膠蟲汙染
特征：無明確定義(yi) ，鏡下無法直接觀察到。主要表現為(wei) 細胞狀態差，黑點和碎片多，布朗運動。通過檢測發現主要為(wei) 細胞支原體(ti) 汙染，部分為(wei) 未知的增殖不明顯的微生物汙染。
處理方式：若細胞汙染後狀態尚可，添加黑膠蟲抑製劑/支原體(ti) 抑製劑培養(yang) 2-3代可轉陰；若細胞汙染後狀態很差，建議消殺後丟(diu) 棄。
細胞交叉汙染
特征：即不同的細胞混雜在一起
鑒定方法：
同種屬：STR鑒定，多等位基因數大於(yu) 3個(ge) 。
（需考慮本身的遺傳(chuan) 背景，如EA.hy 926為(wei) 融合細胞，本身就包含兩(liang) 套遺傳(chuan) 信息）
不同種屬：PCR法，對種屬特異性基因進行擴增，不同種屬產(chan) 物大小不同。
處理方法：建議重新引種。
細胞汙染後的處置
一旦發現有細胞汙染出現，應及時對所用試劑和耗材進行清理。耗材可更換新的或者重新高壓滅菌，試劑可重新過濾除菌或者更換新批次，操作台和細胞房需用消毒液進行全麵清潔消殺後方可複蘇新的細胞，以免反複出現細胞汙染。
細胞汙染防治策略
1
細胞房環境控製
環境要求：
潔淨區10000級，局部100級，定期進行沉降菌檢測
環境消毒：每周一次定期消毒滅菌
1） 地麵/牆麵：84消毒液、新潔爾滅交叉使用
2） 環境消毒：定期紫外照射，臭氧熏蒸
3） 儀(yi) 器設備表麵：75%酒精擦拭
2
實驗人員管理
著裝：
著連體(ti) 衣，戴口罩、手套，頭發、手腕等要包好，減少皮膚外露。
減少走動，出入關(guan) 門，操作時不要講話。
技能:
養(yang) 成良好的無菌操作習(xi) 慣。
其他：
減少共用物品，公共使用區域統一使用習(xi) 慣，區分潔淨區域和有風險的區域。
3
實驗用品管理
試劑：
使用前確保無菌，自己配製的試劑需過濾除菌後再使用。
耗材：
需要重複使用的耗材確保按照規定清洗、高溫高壓滅菌，使用滅菌指示帶。滅菌後烘幹的耗材立刻放進超淨台，一周內(nei) 使用完畢，未使用完的，需重新滅菌再使用。
儀(yi) 器設備：
定期擦拭消毒，培養(yang) 箱、顯微鏡托盤等高風險區域需經常清潔，培養(yang) 箱水盤和複蘇用的水浴鍋需添加抑菌劑。
其他：
當出現培養(yang) 物泄漏時，應及時清理幹淨；出現局部汙染時，應找出細胞汙染源並對環境整體(ti) 消毒。
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