收到大鼠骨髓間充質幹細胞後如何操作？

（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體(ti) 的造血組織，位於(yu) 身體(ti) 的許多骨骼內(nei) 。成年動物的骨髓分兩(liang) 種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能製造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與(yu) 抑製各種病原體(ti) ，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能製造抗體(ti) 。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在於(yu) 長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀鬆骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chan) 生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為(wei) 紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最後幾乎隻有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質係統內(nei) 存在的骨髓間充質幹細胞是一種除造血幹細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的幹細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化，因此可以作為(wei) 組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質幹細胞的體(ti) 外培養(yang) 條件要求較高，在培養(yang) 過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yang) 溫度和培養(yang) 基pH值等條件的影響。

1.首先，觀察細胞瓶是否完好，培養(yang) 液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請及時與(yu) Procell技術支持聯係。2.用75%酒精擦拭細胞瓶表麵，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分貼壁細胞會(hui) 有少量從(cong) 瓶壁脫落，將細胞置於(yu) 細胞培養(yang) 箱內(nei) 靜置培養(yang) ，隔天再取出進行觀察。

3.仔細閱讀細胞說明書(shu) ，了解細胞相關(guan) 信息，如細胞形態、所用培養(yang) 基、血清比例、所需細胞因子等。

4.可將培養(yang) 瓶內(nei) 多餘(yu) 的培養(yang) 基轉移至50ml無菌離心管中，備用；細胞傳(chuan) 代時，可以將該培養(yang) 基按照一定比例和客戶自備的培養(yang) 基混合使用，讓細胞逐漸適應培養(yang) 條件。

5.確認細胞狀態良好後，應及時將細胞凍存，再進行後續的實驗，避免後期實驗失誤可能發生細胞汙染或死亡而導致的細胞丟(diu) 失。

6.建議客戶收到細胞後前3天，100X、200X、400X各拍3-5張細胞照片，記錄細胞狀態，便於(yu) 和Procell技術支持溝通交流。