在普諾賽3月30日開播的細胞培養直播課堂中，有很多同學提出各種疑問。我們篩選出具有代表性的問題，並作了詳細解答。
01 動物細胞怎麽鑒定？
要根據實驗的目的以及細胞類型進行選擇。如果是人源星空体育平台官网网址，並且有文獻或數據庫公布對應細胞信息，則進行STR鑒定即可；如果使非人源的星空体育平台官网网址，可以進行種屬鑒定，並且附加一個研究方向相關的指標進行驗證，部分小鼠細胞也可以做STR鑒定，但目前數據庫不*，很多都沒有匹配數據。對於原代細胞，如果能夠確保取材無誤，僅進行特異性指標方麵的檢測就可以了，方法可采用免疫熒光、流式檢測、WB檢測等。
02 發表高水平文章時，需要提供哪些文件呢？COA？STR？
目前*的細胞鑒定文件為STR鑒定，對於不適用STR鑒定方法的細胞，可以根據自己的研究方向對細胞進行驗證，方法沒有限製，一些新的技術和方法的應用能夠一定程度上提高文章的檔次。
03 原代細胞和星空体育平台官网网址有啥區別？
主要是傳代次數上的差異。原代細胞一般指從動物組織直接提取的細胞，而星空体育平台官网网址是在原代培養的基礎上經過傳代和篩選得到。另外常用的星空体育平台官网网址，都是經過篩選得到的穩定細胞群體，特性在進行連續性實驗時能夠保證結果更加穩定，而原代細胞的優勢則在於與機體細胞特征更加接近。
04 pc12細胞高分化後，多次傳代會影響實驗結果嗎？
PC-12（高分化）細胞是穩定的星空体育平台官网网址，正常傳代不會改變細胞特性，但是傳代過程中如果出現生長過度、汙染等異常情況可能會導致細胞發生變化，所以建議在低代次時凍存保種。若是自行誘導建係的高分化PC-12細胞，則要看誘導後得到的細胞特性是否穩定，一般也是建議在細胞狀態穩定時凍存，避免後續長期傳代培養過程中出現意外。
05 H22的STR為啥和NIH/3T3的STR基本相似？
首先要明確一點，H22和NIH/3T3兩株細胞在特性上差異較大，混淆的概率非常小，而STR位點數據相似，可能是由於這兩株細胞本身親緣關係非常接近。由於很多品種的小鼠都是近交品係，同種小鼠本身親緣關係就比較近，這就有可能導致不同的小鼠細胞會出現位點接近的情況，這也是目前小鼠STR沒有廣泛應用的原因之一。
06 腫瘤相關成纖維細胞也需要自己鑒定吧？
做細胞鑒定需要先明確鑒定的目的。如果自己提取的腫瘤細胞或者癌旁的成纖維細胞，可以用免疫學的方法去確定得到的細胞是屬於什麽類型。
07 ATCC為什麽看不到HSC？
HSC細胞從名稱上來看應該是原代提取細胞的簡稱，或者是簡寫的名稱，並沒有寫全。通用的標準星空体育平台官网网址中，沒有HSC這株細胞的信息。另外，ATCC並沒有收錄所有種類的星空体育平台官网网址，很多國內建係的細胞也無法查到，可以參考PPT中講到的查詢方法，多查幾個細胞庫的資源看看。
08 星空体育平台官网网址具有無限增殖的能力，正常的細胞培養成星空体育平台官网网址之後，那不是很多蛋白的表達都改變了，做蛋白質差異表達分析的不是就不準了嗎？
星空体育平台官网网址具有無限增殖的能力，同時它的另一個要求是穩定傳代。如果是在培養中或者經過篩選得到另外一種特性的細胞，則可以定義為一株新的星空体育平台官网网址；如表達/不表達某某蛋白的細胞，在不經過特殊處理的情況下，傳代過程中細胞發生變異的概率極低。培養條件不改變的情況下，短期內不需要擔心蛋白表達發生變化。
09 BGC胃癌細胞是不是也是汙染了？
如果指的是BGC-823細胞，這株細胞確實是建係時被Hela汙染的，相關信息可以在Expasy網站上查到。
10 在肺泡灌洗液找到了一組細胞，但是我們想鑒定一下到底是什麽細胞，有什麽辦法嗎？
先推斷可能的細胞種類，再根據這些種類選擇對應的指標進行鑒定。如肺泡灌洗液中最可能出現的就是巨噬細胞或脫落的上皮細胞，根據這些種類細胞的指標進行鑒定即可。
11 雞細胞怎麽做鑒定？
確定雞的種屬可以用PCR法，設計種屬特異性的引物進行鑒定；要確定細胞的類型可以用免疫學的方法，選擇對應的抗體進行鑒定。
12 從小鼠原代星空体育平台官网网址中製備可以傳代的星空体育平台官网网址怎樣最快？
從原代培養的細胞建立星空体育平台官网网址，可以通過病毒基因轉染、端粒酶激活等方法。
13 對星空体育平台官网网址進行轉染質粒敲除，敲除後的星空体育平台官网网址可以繼續傳代嗎？
有文獻研究表明，即使敲除了永生化過程中導入的相關基因後，細胞不會停止繼續增殖的情況，反而在細胞特異性分化、分泌代謝等方麵趨於成熟。也就是說，即使敲除了轉染的基因，星空体育平台官网网址也可以繼續傳代。
4月直播課堂將於4月28日開播，記得關注普諾賽公眾號哦~
歡迎來到星空体育平台官网登录網站！
網站首頁
