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細胞學堂 | 培養基顏色改變意味著什麽

更新時間:2023-04-28  |  點擊率:3933


細胞培養(yang) 過程中,培養(yang) 基的顏色變化往往對應著細胞狀態。大多數情況下,我們(men) 所見的培養(yang) 基都呈紅色,這是因為(wei) 細胞培養(yang) 基的PH值大多在7.4左右,添加了酚紅的培養(yang) 基的顏色就是紅色。不同成分培養(yang) 基的顏色會(hui) 有差異,例如DMEM會(hui) 比1640顏色深一點,主要是DMEM裏麵的酚紅含量比1640多導致。當然還有部分培養(yang) 基不含有酚紅,呈現的就是無色或者淡黃色。


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圖1:DMEM培養(yang) 基正常顏色


很多時候,培養(yang) 基顏色並不是我們(men) 所見的紅色,而是偏紫或偏黃,不同顏色培養(yang) 基究竟對應何種細胞狀態呢?本期細胞學堂將為(wei) 您揭曉培養(yang) 基顏色變化的原因。




培養(yang) 基顏色偏紅或者紫




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圖2:使用了一段時間後的培養(yang) 基顏色偏深


開封了一段時間後的培養(yang) 基,顏色會(hui) 比正常深很多,如上圖。主要是因為(wei) 大部分細胞培養(yang) 基所用的緩衝(chong) 體(ti) 係為(wei) NaHCO3,培養(yang) 基開封後NaHCO3會(hui) 分解成CO2溢出,導致培養(yang) 基偏堿;可以將培養(yang) 瓶擰鬆放置於(yu) CO2培養(yang) 箱中一段時間後,培養(yang) 基顏色會(hui) 變正常。





顏色變深的培養(yang) 基能不能繼續使用?


部分細胞能夠很快適應培養(yang) 基的這種PH值波動,放入培養(yang) 箱後可以正常生長;也有極少數的細胞會(hui) 比較敏感,造成細胞漂浮過多等情況,如BV2細胞會(hui) 就比較敏感,可能出現漂浮增多的情況。


Tips:建議配好完-全培養(yang) 基後,分裝到50mL離心管,並於(yu) 一周內(nei) 用完,量少時放到15mL離心管裏保存。




培養(yang) 基顏色變黃




通常培養(yang) 基裏的酚紅指示劑遇酸會(hui) 變黃,但也有可能是細胞被汙染而導致的培養(yang) 基顏色變黃,以下為(wei) 幾種常見情況:


#1

由於(yu) 細胞代謝產(chan) 酸,培養(yang) 了細胞後的培養(yang) 基會(hui) 從(cong) 紅變黃,如果培養(yang) 基是橘黃色,則是細胞健康生長的顏色,無須擔心,繼續培養(yang) 即可。


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圖3:培養(yang) 細胞後的培養(yang) 基顏色


#2

若細胞狀態良好,但換液後培養(yang) 基顏色變黃快,則可能是因為(wei) 細胞密度大或消耗過大,提示需要傳(chuan) 代了。

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圖4:培養(yang) 基快消耗完時的顏色


#3

若細胞狀態差,生長異常,培養(yang) 基很快變黃,變渾濁,鏡下觀察有較多小顆粒物,則有可能是細菌汙染(如圖5)或支原體(ti) 汙染。輕度汙染可用抗生素清洗處理或使用支原體(ti) 清除試劑,重度汙染建議消殺後丟(diu) 棄。


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圖5:細菌汙染時培養(yang) 基顏色