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細胞學堂｜細胞培養基的種類以及如何選擇

更新時間：2023-06-20  |  點擊率：1776



  一  

常見的細胞培養(yang) 基


細胞培養(yang) 基既是培養(yang) 細胞中供給細胞營養(yang) 和促使細胞生殖增殖的基礎物質，也是培養(yang) 細胞生長和繁殖的生存環境。


基礎培養(yang) 基（MM）

基礎細胞培養(yang) 基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。合成培養(yang) 基使用時還需添加一定量的血清使細胞保持良好的生長狀態。


培養(yang) 基的種類有很多，其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是應用較為(wei) 廣泛的。其他如M199、IMDM、L15培養(yang) 基等也用於(yu) 某些細胞的培養(yang) 。具體(ti) 的特征及應用如下：



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培養(yang) 基

特征

應用

BME細胞培養(yang) 基

1955年Eagle設計，以BSS為(wei) 基礎，添加8種維生素，13種氨基酸，成分簡單、便於(yu) 添加

適於(yu) 各種星空体育平台官网网址和特殊研究用，在此基礎上改良的細胞培養(yang) 基品種有MEM、DMEM、IMDM等

MEM細胞培養(yang) 基

由Harry Eagle在Eagle基本培養(yang) 基（BEM）的基礎上發展而來的。MEM培養(yang) 基僅(jin) 含有12種必需氨基酸、穀氨酰胺和8種維生素，成分簡單，主要用於(yu) 貼壁細胞的培養(yang) ，1959年修改配方，刪去賴氨酸、生物素，增加氨基酸濃度，配方修改後也可用於(yu) 其他類型細胞培養(yang)

適合多種細胞單層生長，是一種最基本、適用範圍最-廣的培養(yang) 基。因其營養(yang) 成分所限，針對生產(chan) 之特定細胞培養(yang) 與(yu) 表達時，並不一定是使用效果最-佳或者最-經濟的培養(yang) 基。此外，MEM細胞培養(yang) 基有含Earle's平衡鹽的類型，也有含Hanks'平衡鹽的類型；有高壓滅菌型的，也有過濾除菌型的；還有含非必需氨基酸的類型。應根據實際情況注意選擇合適的 MEM 細胞培養(yang) 基

M199細胞培養(yang) 基

1950 年由 Morgan 等設計，除 BSS 外，含有53 種成分

添加適量的血清後，可廣泛用於(yu) 多種細胞培養(yang) ，可用於(yu) 病毒學、疫苗生產(chan) 以及大鼠胰腺上皮細胞和小鼠晶狀體(ti) 組織的培養(yang)

DMEM細胞培養(yang) 基

由Dulbecco改良的 Eagle 培養(yang) 基，DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩(liang) 倍，維生素濃度是MEM的4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。分低糖型（1000mg/L）、高糖型（4500mg/L）

常用於(yu) 雜交瘤的骨髓瘤細胞和 DNA 轉染的轉化細胞培養(yang) 。例如 CHO 細胞表達生產(chan) 乙肝疫苗、CHO 細胞表達EPO

IMDM細胞培養(yang) 基

由Iscove's改良的Eagle培養(yang) 基，IMDM培養(yang) 基在DMEM培養(yang) 基的基礎上添加了硒、HEPES、丙酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素，營養(yang) 非常豐(feng) 富

可用於(yu) 雜交瘤細胞和高密度細胞的快速培養(yang)

RPMI-1640細胞培養(yang) 基

Moore等人於(yu) 1967年在Roswell Park Memorial Institute研製，針對淋巴細胞培養(yang) 設計，BSS＋21種氨基酸＋維生素11種等成分

廣泛應用於(yu) 各種正常細胞和癌細胞的培養(yang) ，尤其是懸浮細胞的培養(yang)

Ham's F10、F12細胞培養(yang) 基

1963年、1969年由Ham設計，含微量元素，Ham's F-12以Ham's F-10營養(yang) 混合物為(wei) 基礎設計而成的，可在血清含量低時用

F10適用於(yu) 倉(cang) 鼠、人二倍體(ti) 細胞，F12適用於(yu) CHO細胞。在低血清含量下時，特別適合單細胞培養(yang) 和克隆化培養(yang) ，添加血清後也廣泛應用於(yu) 癌細胞和原代細胞的培養(yang) ，如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞、軟骨細胞、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等

DMEM/F12細胞培養(yang) 基

在DMEM培養(yang) 基的基礎上，添加F12培養(yang) 基中更為(wei) 豐(feng) 富的營養(yang) 成分，含有多種微量元素

廣泛應用於(yu) 多種哺乳類細胞的培養(yang) 。同時，常作為(wei) 開發無血清培養(yang) 基的基礎，也適用於(yu) 低血清含量下哺乳動物細胞的培養(yang) 以及克隆密度培養(yang)

McCoy's 5A培養(yang) 基

Thomas McCoy等人在1959年設計的培養(yang) 基，最初專(zhuan) 門用於(yu) Novikoff Hepatoma細胞的培養(yang) 。McCoy's 5A培養(yang) 基是改良的Basal Medium 5A，與(yu) 其他培養(yang) 基不同的是，McCoy's 5A含有還原型穀胱甘肽、細菌蛋白腖以及高濃度的葡萄糖

McCoy's 5A廣泛用於(yu) 多種類型的原代細胞的培養(yang) ，如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網膜等。此外McCoy's 5A培養(yang) 基還用於(yu) 組織活檢培養(yang) 、細胞建係，以及一些淋巴細胞和較難培養(yang) 的細胞的培養(yang)

L15細胞培養(yang) 基

L-15培養(yang) 基的緩衝(chong) 係統由磷酸鹽和遊離堿基氨基酸組成，代替了傳(chuan) 統的碳酸氫鈉緩衝(chong) 係統，同時，用半乳糖和丙酮酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chan) 物的形成，有助於(yu) 維持培養(yang) 液PH的穩定，適合用於(yu) 非CO2平衡環境的細胞培養(yang)

L-15培養(yang) 基適用於(yu) 猴腎細胞和HEP-2的培養(yang) 、原代（如胚胎和成人組織）細胞分離、多種病毒的培養(yang) 以及神經元的培養(yang) 等




完-全培養(yang) 基（CM）


完-全培養(yang) 基是在基礎培養(yang) 基中添加了血清、抗生素等物質，也叫（血清）細胞培養(yang) 基。其中大部分細胞培養(yang) 常用的是牛血清，因為(wei) 牛血清中含有促進細胞增殖的各種生長因子。此外為(wei) 防止汙染，培養(yang) 液中尚需加一定量的抗生素。


完-全培養(yang) 基根據添加血清量的多少，可分為(wei) 細胞生長培養(yang) 基和細胞維持培養(yang) 基，用於(yu) 不同細胞和不同研究。


無血清細胞培養(yang) 基（SFM）


無血清培養(yang) 基是指在合成培養(yang) 基的基礎上引入成分完-全明確或部分明確的血清替代成分，主要是由基礎培養(yang) 基和添加物（替代血清的補充因子）組成。其主要成分為(wei) 下列幾種：


黏附因子


約有80%的細胞是屬於(yu) 貼附型生長。一般的細胞培養(yang) 基是利用血清作為(wei) 其來源，在無血清培養(yang) 基中，細胞黏附因子就是很重要的物質。


生長因子


生長因子是維持細胞活性與(yu) 促進細胞增生、遷移、分化等，不可-或缺的要素。


酶抑製劑


貼附型細胞一般多以胰蛋白酶（trypsin）進行傳(chuan) 代。在一般細胞培養(yang) 中，血清中含有抑製trypsin的成分，所以無血清培養(yang) 基必須添加trypsin抑製劑。


細胞轉入無血清培養(yang) 之前，要留有種子細胞，種子細胞按常規培養(yang) 於(yu) 含血清的培養(yang) 基中，以保證細胞的特性不發生變化。


優(you) 點

1

未知組分少；

2

避免血清對細胞的毒性作用和血清源性汙染；

3

雜蛋白含量少，避免血清成分影響研究結果或是產(chan) 品製程，提高產(chan) 品表達水平並易於(yu) 純化。

缺點

1

無血清培養(yang) 基成本較高；

2

不是所有的細胞都能在無血清培養(yang) 基中培養(yang) ；

3

細胞在無血清培養(yang) 基中易受某些機械因素和化學因素的影響，培養(yang) 基保存和應用方麵局限性很大。




二

細胞培養(yang) 基的選擇


細胞培養(yang) 基的種類很多，如何選擇適宜的培養(yang) 基是細胞培養(yang) 的關(guan) 鍵。在此提供以下建議可供參考：


1

如果是新購買(mai) 的細胞，可以向細胞株的廠家谘詢，或者詢問引種來源查找細胞庫上對應的培養(yang) 基；

2

根據細胞的特點及實驗的需要來選擇培養(yang) 基；

3

自己試驗，用多種培養(yang) 基培養(yang) 細胞，做生長曲線，記錄細胞的生長速度，觀察細胞的形態變化，根據實驗結果選擇最佳培養(yang) 基。


培養(yang) 基種類和星空体育平台官网网址並不是一個(ge) 強製的對應關(guan) 係。具體(ti) 培養(yang) 細胞使用什麽(me) 培養(yang) 基，主要還是根據數據庫、文獻和經驗哦！