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細胞學堂 | 293星空体育平台官网网址家族譜係大揭秘

更新時間:2023-06-27  |  點擊率:1059


HEK293細胞的起源



HEK293細胞的曆史可以追溯到1973年,當時荷蘭(lan) 萊頓大學的Alex Van Der Eb博士和Frank Graham博士在研究人類腺病毒(Adenovirus)時培養(yang) 了這種細胞,細胞命名中的數字可以追溯到他的第293次實驗產(chan) 生的原始細胞克隆這一事實。通過腺病毒5(Ad5 DNA)進行了轉染,由於(yu) 存在Ad5 E1A/B基因,使其細胞周期以及細胞表型、核型等發生了改變,獲得永生化特性,在生產(chan) 腺病毒載體(ti) 和腺相關(guan) 病毒載體(ti) 、生產(chan) 蛋白、疫苗、抗癌試劑以及細胞生物學研究上廣泛應用。



HEK293星空体育平台官网网址的特點和用途


目前為(wei) 止,HEK293細胞有多種衍生星空体育平台官网网址,每種星空体育平台官网网址的特點不盡相同,用途也存在著差異。今天小普給大家介紹下有關(guan) 293T、293F、293H和293S四大分支細胞的特點及用途。


圖片

HEK293星空体育平台官网网址及其衍生/曆史的示意圖




HEK293T



它是HEK293星空体育平台官网网址的亞(ya) 克隆,經過修飾表達SV40 T抗原,其表達的SV40T抗原可以實現外源表達載體(ti) 的擴增,最終增加目的基因表達,常用於(yu) 慢病毒、逆轉錄病毒及腺病毒的包裝。


HEK293H



來自表達E1A腺病毒基因的HEK293細胞,粘附性較強,常用於(yu) 噬菌斑檢測實驗和重組蛋白的表達和生產(chan) 。在293H細胞中插入EBNA-1基因可得到293E,該基因含有EBV複製起點(oriP)的重組表達載體(ti) ,能夠在H293E細胞中複製,顯著提高蛋白的表達;293-6E細胞是在293-H細胞表達截斷的EBNA1,其能夠在無血清培養(yang) 體(ti) 係中進行蛋白表達及病毒載體(ti) 的生產(chan) 。


HEK293F



由HEK293星空体育平台官网网址衍生的一個(ge) 可以在無血清培養(yang) 基中快速增長的星空体育平台官网网址,可以高效表達蛋白。由293F細胞導入pCMVSPORT6TAg.Neo質粒可獲得293FT,可以用於(yu) 生產(chan) 慢病毒載體(ti) 和基因編輯等領域。293FTM細胞是由Flp-InTM T-RExTM 293細胞導入單嗜性(ecotropic)報告質粒和MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap) 報告質粒獲得,常用於(yu) 蛋白互作篩選。


HEK293S



用逐漸適應性培養(yang) 的方法,將細胞馴化成能夠懸浮培養(yang) 且耐受低Ca2+培養(yang) 的星空体育平台官网网址,即293S細胞。293S細胞用甲烷磺酸誘變和蓖麻毒素選擇修飾,再轉染pcDNA6/TR質粒,得到293SG細胞,常用於(yu) 同源的N-糖基化蛋白的表達。此外,該星空体育平台官网网址中具有四環素表達抑製基因,也可用於(yu) 四環素誘導的蛋白表達研究。;用pcDNA3.1-zeo-STendoT質粒對293SG細胞進行轉化,得到293SGGD細胞,用於(yu) 糖基化工程研究中。




HEK293細胞的應用



HEK293細胞在一些研究領域中的應用非常廣泛,概述如下:

受體(ti) 信號

HEK293可用於(yu) 離子通道和細胞膜受體(ti) 的異源表達,通常用來研究與(yu) 疾病相關(guan) 的G蛋白偶聯受體(ti) 信號通路。

癌症研究

HEK293細胞具有致瘤性,常用於(yu) 癌症研究。適用於(yu) 測試分析癌症治療效果。

蛋白質生產(chan)

HEK293細胞可大量產(chan) 生重組蛋白,可用於(yu) 開發生產(chan) 疫苗和生物治療性蛋白。

基因表達實驗

HEK293細胞常用於(yu) 轉染,檢測表達基因或蛋白,更好的研究基因表達和功能,蛋白質功能以及基因突變等。








參考文獻

1. Hu J, Han J, Li H, et al. Human Embryonic Kidney 293 Cells: A Vehicle for Biopharmaceutical Manufacturing, Structural Biology, and Electrophysiology. Cells Tissues Organs. 2018;205(1):1-8. doi:10.1159/000485501

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3. Lin YC, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. Nat Commun. 2014;5:4767. Published 2014 Sep 3. doi:10.1038/ncomms5767