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細胞名稱
MEG-01 (人成巨核細胞白血病細胞)
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別名
Meg-01; MEG01; Meg01
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細胞培養(yang) 條件
RPMI-1640+10% FBS+1% P/S,37℃;5% CO2
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生長特性
半貼半懸
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細胞形態
淋巴母細胞樣
MEG-01是一種巨核母星空体育平台官网网址,該細胞來自於(yu) 一名費城染色體(ti) (Ph)陽性的慢性粒細胞性白血病(CML)患者。1983年由Michinori Ogura, Yasuo Morishima等人從(cong) 一名55歲患有慢性粒細胞性白血病(CML)且處於(yu) CML爆發危機的男性的骨髓樣本中提取。
MEG-01細胞沒懸浮的細胞大多為(wei) 圓形或者卵圓形,貼壁的細胞會(hui) 伸出偽(wei) 足。細胞質相對嗜堿性,並含有少量空泡,還觀察到細胞質突起。單克隆抗體(ti) 的間接免疫熒光試驗顯示,MEG-01細胞表麵的FVIII相關(guan) 抗原呈陰性,該抗原在MEG-01細胞特別是大細胞的細胞質中呈陽性。所有細胞均呈彌漫性和細顆粒狀的酸性磷酸酶強陽性。
MEG-01不僅(jin) 為(wei) 研究人類巨核細胞分化和成熟提供研究模型,而且為(wei) 血小板或蛋白質如FVIII相關(guan) 抗原、血小板糖蛋白或血小板衍生生長因子(PDGF)等的產(chan) 生和釋放提供一種有用的研究模型。
培養(yang) 中始終存在一些黑點樣碎片,不需要特殊處理。大部分細胞呈不規則圓形懸浮狀態,有少量細胞呈梭形貼壁。
以T25瓶為(wei) 例
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該細胞為(wei) 半貼壁半懸浮細胞,其中貼壁細胞較少或到50%均為(wei) 正常,可以按懸浮細胞的培養(yang) 方式傳(chuan) 代,貼壁部分吹下即可(如遇吹不下來,可用0.25%胰酶適當消化);
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維持細胞密度在3-10×105cells/mL培養(yang) ,初始接種密度不低於(yu) 3×105cells/mL,長到10×105cells/mL左右進行傳(chuan) 代。建議前期計數後操作,後麵可以根據經驗傳(chuan) 代;
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每隔3天計數操作一次,如密度低於(yu) 3×105cells/mL可更換小體(ti) 積容器(如孔板)進行培養(yang) ;
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根據細胞密度選擇其中一種操作方法:
半換液。如密度不足8×105cells/mL則進行半換液;緩緩吸出上層一半的培養(yang) 液,於(yu) 1200 rpm(250g左右) 3min離心收集細胞,加入等體(ti) 積新鮮培養(yang) 基重懸細胞,輕輕吹打3-5次,接回原瓶繼續培養(yang) ;
1:2稀釋傳(chuan) 代。如密度接近10×105cells/mL左右,則將細胞等體(ti) 積分裝到兩(liang) 個(ge) 新培養(yang) 瓶,每瓶分別補加新鮮培養(yang) 基到總體(ti) 積5mL;
全離心換液或傳(chuan) 代。細胞每持續培養(yang) 超一周可進行一次全離心換液或者傳(chuan) 代,不建議頻繁用離心的方式換液或傳(chuan) 代;離心轉速推薦1200rpm 3min。
推薦凍存密度:
3~5×106 cells/mL ;
凍存液配比:
55% RPMI-1640 +40% FBS+5%DMSO,需使用程序凍存盒梯度降溫凍存。
生長圖片
圖1:建係文檔中的MEG-01細胞圖
圖2:ATCC培養(yang) 圖,來源於(yu) ATCC
圖3:普諾賽培養(yang) 圖
參考文獻:
[1] Ogura M, et al. Establishment of a novel human megakaryoblastic leukemia cell line, MEG- 01, with positive Philadelphia chromosome. Blood 66: 1384-1392, 1985. PubMed: 2998511