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培養(yang) 細胞時，由於(yu) 培養(yang) 的環境各不相同，同時細胞各階段的形態也存在一定差異，沒有一個(ge) 確定的參照物去比對，很多老師同學也無法確定自己所養(yang) 細胞的狀態是否正常。
那麽(me) 如何判斷細胞狀態是正常還是異常呢？本期細胞學堂將詳介紹幾種常用的判斷方法，學會(hui) 這幾招，輕鬆辨別細胞狀態！
01 如何判斷細胞活率
台盼藍是細胞活性染料，常用於(yu) 檢測細胞膜的完整性，可以檢測出細胞是否存活。正常的活細胞，胞膜結構完整，能夠排斥台盼藍，使之不能夠進入胞內(nei) ；而喪(sang) 失活性或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被台盼藍染成藍色。
通常認為(wei) 細胞膜完整性喪(sang) 失，即可認為(wei) 細胞已經死亡。活細胞不著色，而死細胞會(hui) 被染成藍色。
(無色為(wei) 活細胞，藍色為(wei) 死細胞)
染色時間不能太長，3分鍾內(nei) 觀察，超時後活細胞也會(hui) 逐漸積累染料而染成顏色，使檢測結果出現偏差。
在顯微鏡下觀察細胞形態：
懸浮細胞
活細胞透亮有光澤，死細胞暗淡無光且膜碎裂；
貼壁細胞
活細胞可貼壁且膜完整，死細胞不能貼壁。
（紅色圈為(wei) 死細胞；綠色圈為(wei) 活細胞；箭頭為(wei) 血清雜質）
細胞膜作為(wei) 判斷細胞活性的標準之一，有的老師用“邊界清晰"來界定，認為(wei) 邊界不清晰則是細胞狀態變差，實際情況我們(men) 也有發現部分細胞膜邊緣很薄再加上顯微鏡不清晰導致誤判，所以小普認為(wei) 膜邊界是否清晰並不是金標準，我們(men) 更傾(qing) 向於(yu) 以細胞膜完整性作為(wei) 判斷標準，“膜完整"則為(wei) 活細胞。
（該細胞膜邊緣薄透，若為(wei) 黃光顯微鏡可能看不清）
02 如何判斷細胞形態異常
1
你的細胞應該長成什麽(me) 樣?
在懷疑細胞形態改變之前，我們(men) 首先得知道一個(ge) 正常的細胞應該是什麽(me) 樣的，誠如每顆多肉都會(hui) 有其獨-特的色彩和習(xi) 性，細胞也有其獨-特的習(xi) 性，包括生長速度、形態、培養(yang) 環境等；
2
從(cong) 哪幾個(ge) 方麵判定細胞形態異常？
細胞的微環境會(hui) 導致細胞形態改變，例如血清直接影響細胞的形態：
HK-2細胞顯微圖（無血清培養(yang) 基培養(yang) ）
HK-2細胞顯微圖（MEM +10%FBS培養(yang) ）
是否所有的形態改變都可以被定義(yi) 為(wei) 異常呢？答案是否定的。從(cong) 上述例子中可以看出，兩(liang) 種培養(yang) 環境下細胞形態不同，但狀態都並無異常，因此我們(men) 需要視不同情況、綜合細胞增長速度進行評判：
未更換培養(yang) 體(ti) 係時
在培養(yang) 體(ti) 係沒有更換的前提下，細胞碎裂增多，黑點增多、形態改變、生長速度變慢，則應考慮外源刺激物導致，可能已被汙染，需排查汙染源，並做針對性的預防措施。
更換了培養(yang) 體(ti) 係時
1
如果是因為(wei) 更換了培養(yang) 體(ti) 係後導致的細胞形態改變，在細胞生長速度正常的情況下，可正常培養(yang) ；
2
如果細胞更換培養(yang) 條件後，嚴(yan) 重變形甚至貼壁減少且不能正常傳(chuan) 代，必須進行幹預，可通過包被培養(yang) 瓶促進貼壁、增加血清濃度、與(yu) 原培養(yang) 基混合使用讓細胞過渡適應等方式進行改善；
3
如果細胞對於(yu) 新環境反應激烈，直接死亡，則需更換培養(yang) 體(ti) 係；
03 如何判斷細胞汙染
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