歡迎來到星空体育平台官网登录網站！歡迎來到星空体育平台官网登录網站！
400-999-2100
原代培養(yang) 是指由體(ti) 內(nei) 取出組織或細胞進行的首-次培養(yang) ，也叫初代培養(yang) ，是星空体育平台官网网址建立的第一步。
在9月22日開播的“原代細胞常見問題解決(jue) 方案"課程中，有很多老師就原代細胞培養(yang) 問題提出了疑問。我們(men) 篩選出部分代表性問題，並作了詳細解答。
臍靜脈內(nei) 皮細胞需要包被嗎？選用什麽(me) 包被比較好？
臍靜脈內(nei) 皮細胞建議包被，建議選用0.1%明膠包被，包被的細胞形態會(hui) 比不包被的好看。
角質細胞需要包被嗎？
角質細胞生長類似上皮細胞，營養(yang) 環境要求高，建議使用膠原蛋白包被。
細胞原皿狀態很好，傳(chuan) 代後細胞邊界不清楚是什麽(me) 原因？感覺虛化的很快。
傳(chuan) 代後邊界不清晰，考慮細胞是否需要外基質條件，嚐試包被培養(yang) 瓶；其次考慮細胞是否老化、分化。
請問真菌汙染了怎麽(me) 辦？就丟(diu) 了這瓶細胞嗎？
真菌汙染細胞，建議丟(diu) 棄，避免對其他細胞造成交叉汙染，損失更大；若要挽救，建議隔離培養(yang) ，加兩(liang) 性-黴素B等抗生素，每天換液，持續清除，但隻能維持幾周，後續培養(yang) 會(hui) 反複爆發，耗費成本更高。
支原體(ti) 汙染會(hui) 改變細胞的形狀嗎？細胞裏麵也有很多小碎片，這該怎麽(me) 辦？用抗支原體(ti) 藥可以去除細胞外碎片，但是細胞裏的無變化。
汙染較輕的，不會(hui) 影響細胞狀態，出現大量碎片，細胞內(nei) 部也有碎片，汙染就很嚴(yan) 重了，支原體(ti) 清除試劑對外部清除有效，內(nei) 部較難清除；同時在細胞內(nei) 部已損傷(shang) 情況下，沒有必要清除，此時細胞已經喪(sang) 失很多功能，建議廢棄。
肝細胞培養(yang) 中包被對其影響大嗎？
肝細胞營養(yang) 環境要求較高，建議包被，不包被影響貼壁率（低於(yu) 50%），長時間培養(yang) 不包被會(hui) 導致細胞卷曲聚團，影響狀態。
原代人牙周膜細胞凍存複蘇後貼壁很少且生長很慢，怎麽(me) 處理呢？
原代細胞複蘇貼壁少，生長慢，首先是調整細胞密度保持在70%以上，確保生長狀態，其次選用高質量血清或培養(yang) 基進行補救，也可以補加5%血清。
小鼠原代雪旺細胞傳(chuan) 代後不增殖怎麽(me) 辦？
一般建議：
1
靜置培養(yang) 細胞，細胞在穩定環境下更易生長，一般3-5天可有變化；
2
調整細胞密度，控製在70%-80%，更利於(yu) 細胞生長；
3
補加適量血清促進細胞增殖，或更換質量更高的血清，提高營養(yang) 因子促進細胞生長。雪旺細胞分離初期1-2周是處於(yu) 停止增殖狀態的，度過該時期才會(hui) 增殖。
原代細胞的紅細胞較多怎麽(me) 辦？需要紅細胞裂解液嗎？
分離初期紅細胞較多，可用淋巴細胞分離液或Percoll分離液分離，也可用裂解液處理。
原代分離肺動脈平滑肌細胞，酶消化法和貼壁法，哪個(ge) 更好呢？
貼壁法細胞爬出慢，周期長，成功率不高耗費時間，得到的細胞活性相對高；消化法，速度快，數量多，剛分離的活性差一點，後期培養(yang) 要適應，看自主需求選擇。
幹細胞傳(chuan) 代次數有限製嗎？
理論上無傳(chuan) 代次數限製，實際培養(yang) 中，受離體(ti) 培養(yang) 環境變化、血清質量、培養(yang) 基質量、傳(chuan) 代損傷(shang) 等外部培養(yang) 環境影響，細胞超過10代以上會(hui) 出現分化、不增殖、老化凋亡等問題，所以常規建議10代以內(nei) 使用。
我們(men) 取的骨骼肌衛星細胞，在大皿養(yang) 沒事，一換液就漂，是啥原因？
骨骼肌衛星細胞，本身貼壁性不強，易漂浮，特別是局部密度大會(hui) 導致細胞聚集成束，最後分化形成肌管束，建議培養(yang) 中均勻接種，包被增強吸附性，控製密度在70-80%。
脂肪細胞原代培養(yang) 分離細胞時，沒有細胞怎麽(me) 辦？
脂肪細胞原代培養(yang) 沒分出細胞，一是要檢查分離方法是否正確，中間每一步操作最好進行鏡檢，可以找出是哪一步損失細胞的，二是考慮後麵離心步驟是否損失細胞，細胞包含脂滴，密度較小，漂浮丟(diu) 棄了也有可能。
網站首頁
