細胞學堂 | 實驗室汙染應對攻略

因此，對實驗室汙染進行預防、排查與(yu) 清除，是至關(guan) 重要的。本期細胞學堂為(wei) 您整理了一份實驗室汙染最-全應對攻略，幫助您快速上手清除汙染。

不斷完善無菌實驗室規章製度，加強無菌實驗室的管理。外來進修人員、實習(xi) 學生進入實驗室前要進行培訓和教育，掌握一定的基本理論、實驗技能、操作規程後，在帶教老師的指導下方可進行實驗操作。

工作台實驗前紫外燈消毒30 min，實驗後用75%的酒精擦拭台麵；實驗廢棄物高壓蒸汽滅菌後，丟(diu) 棄至醫療廢物桶；無菌室以10 mL/m²的甲醛（40%），5 g/m²濃度的高錳酸鉀定期封閉消毒^[2,3]，若采用甲醛熏蒸，甲醛氣體(ti) 必須分布到房間的每個(ge) 角落。也可以使用普諾賽細胞房安全衛士、水浴鍋安全衛士進行定期清理。

實驗人員進入實驗室必須穿隔離衣，盡量減少頻繁出入細胞實驗室，在操作過程中動作輕柔，避免微生物氣溶膠的產(chan) 生。一旦發現汙染，應立即排查原因，采取有效可靠的方法清除汙染源，盡可能的防止大麵積汙染。

細菌、真菌等廣泛存在於(yu) 自然界中，屬於(yu) 條件致病菌，有很強的繁殖能力，溫暖潮濕的環境，會(hui) 大量滋生。因此，必須控製實驗室的溫度和濕度，保持室內(nei) 幹燥與(yu) 清潔，阻止細菌、真菌等繁殖，切斷其傳(chuan) 播途徑。

實驗室常見汙染有細菌、真菌、支原體(ti) 、黑膠蟲等。在不確定是否汙染的情況下，可進行排查，初步確定是否汙染及汙染的類型。

對懷疑汙染的地方，比如操作台、培養(yang) 箱、顯微鏡等，用醫用滅菌級棉簽蘸取采樣液（生理鹽水）進行采樣；對可疑培養(yang) 試劑，吸取少量試劑進行取樣；對懷疑有汙染的細胞，吸取培養(yang) 液上清進行取樣。

將采集的樣本分別置於(yu) 瓊脂培養(yang) 基與(yu) DMEM培養(yang) 基中，瓊脂培養(yang) 基放於(yu) 生化培養(yang) 箱培養(yang) 48 h，DMEM培養(yang) 基置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 7 d。

觀察瓊脂培養(yang) 基是否出現細菌或者真菌菌落；可選擇使用PCR法、顯色法或熒光染色法檢測是否有支原體(ti) 汙染；對於(yu) “黑膠蟲"汙染，目前沒有明確鑒定方法。

使用75%的酒精擦拭操作台/儀(yi) 器設備，進行消毒。甲醛（40%）10 mL/m²，高錳酸鉀5 g/m²，熏蒸細胞培養(yang) 室。同時也可使用普諾賽細胞房安全衛士、水浴鍋安全衛士進行殺菌消毒。