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細胞學堂 | 細胞拉絲的五大常見原因及解決方法

更新時間:2024-07-12  |  點擊率:1961


通常情況下,細胞在體(ti) 外培養(yang) 環境中大多呈現扁平、多角形或圓形等形態,這些細胞形態對於(yu) 細胞的營養(yang) 吸收、分裂增殖及物質轉運等生理活動至關(guan) 重要。然而,不少研究者在實際培養(yang) 過程中會(hui) 遇到細胞形態異常的問題,尤其是細胞出現“拉絲(si) "現象。這一現象,往往伴隨細胞狀態變差,對實驗結果的準確性及實驗進展構成了不容忽視的影響。




本期細胞學堂,我們(men) 將為(wei) 您詳細介紹細胞培養(yang) 過程中出現拉絲(si) 現象可能的原因,並針對性提供解決(jue) 方法,助您細胞培養(yang) 無憂!





細胞拉絲(si) 常見原因及解決(jue) 方法

拉絲(si) 為(wei) 部分細胞的正常形態

某些細胞株在正常培養(yang) 過程中,如SH-SY5Y(人神經母細胞瘤細胞)和K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞),通過光學顯微鏡觀察(如圖1和2所示)細胞本身形態就有拉絲(si) 和觸角狀形態,是其正常形態。

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圖1. SH-SY5Y細胞形態

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 圖2. K7M2 wt細胞形態

  解決(jue) 方法:


在初次培養(yang) 不熟悉的細胞過程中,若觀察到拉絲(si) 現象,首先建議參考權-威細胞庫提供的細胞圖片,以鑒別該細胞本身是否具有拉絲(si) 的形態特征。對於(yu) 本身形態就存在拉絲(si) 特征的這類細胞,無需針對拉絲(si) 現象進行特殊處理。然而,如果經過對比明確細胞本身不具有拉絲(si) 的形態特征,且伴隨有細胞增殖變慢或其他改變時,那麽(me) 就需要進一步排查可能的原因。




細胞接種密度過高或過低

細胞接種密度過高時,細胞之間的營養(yang) 和空間競爭(zheng) 會(hui) 加劇,這種競爭(zheng) 壓力可能導致細胞形態拉絲(si) 。若使用無血清培養(yang) 基培養(yang) 間充質幹細胞,接種密度過低,也可能導致細胞長不起來,細胞形態會(hui) 逐漸伸長拉絲(si) 。

  解決(jue) 方法:


根據細胞的特性,選擇合適的接種密度,並定期進行細胞傳(chuan) 代,將細胞密度維持在合適範圍內(nei) 。




培養(yang) 條件不當

如培養(yang) 基配方錯誤、培養(yang) 基中關(guan) 鍵營養(yang) 物質(如氨基酸、維生素、生長因子等)不足、pH值變化、溫度波動或氣體(ti) 環境(如CO₂濃度)不適宜,均可能影響細胞正常形態與(yu) 功能,導致細胞拉絲(si) 。

  解決(jue) 方法:


使用新鮮配製的培養(yang) 基培養(yang) 細胞;根據細胞的生長情況,及時換液,確保培養(yang) 過程中營養(yang) 充足;必要時可嚐試提高血清使用濃度(終濃度不超過20%)更換高品質胎牛血清(如圖3所示)

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圖3. Renca(小鼠腎癌細胞)細胞形態




操作不當

在處理如貼壁細胞等需要消化的細胞時,解離試劑的選擇、消化時間的控製、操作力度的把握等都至關(guan) 重要。解離試劑選擇不當、消化時間過長或操作力度過大等均可能導致細胞受損,進而引發細胞形態改變,出現拉絲(si) 現象。

  解決(jue) 方法:


針對不同細胞選擇合適的解離試劑,控製消化時間,在消化過程中操作輕柔,最-大程度降低消化過程對細胞的損傷(shang) 。




細胞汙染

在細胞培養(yang) 的過程中,若出現細菌、真菌、支原體(ti) 、黑膠蟲等汙染,其與(yu) 細胞爭(zheng) 奪營養(yang) ,同時產(chan) 生有細胞毒性的代謝產(chan) 物,將會(hui) 導致細胞狀態明顯變差,細胞可能出現拉絲(si) 現象。

  解決(jue) 方法:


提高細胞培養(yang) 過程中的無菌操作意識,使用無菌試劑、耗材。對於(yu) 支原體(ti) 、黑膠蟲等不易察覺的汙染,可以定期檢測或空培確定是否發生汙染。及時發現,及時處理,有效防止汙染範圍的擴大。



以上就是關(guan) 於(yu) 細胞拉絲(si) 原因及解決(jue) 方法的詳細解讀,更多細胞培養(yang) 幹貨,請持續關(guan) 注細胞學堂專(zhuan) 欄~