直播答疑 | 細胞培養實驗室的環境要求和監測方法

在正常情況（未出現汙染）下，培養(yang) 箱的水盤應使用75%酒精擦拭消毒，然後加入無菌水並添加適量的抑菌劑。當培養(yang) 箱出現汙染時，可以使用新潔爾滅消毒液或3%的過氧化氫消毒液對水盤進行消毒，消毒時間為(wei) 30 min。此外，也可以使用紫外燈進行消毒處理，消毒完成後用無菌水擦拭幹淨，添加無菌水和抑菌劑後正常使用。

培養(yang) 箱內(nei) 的HEPA過濾器一般不需要單獨清潔，當使用出現異常時可以進行更換（需要專(zhuan) 業(ye) 維修人員更換）。對於(yu) 超淨工作台和生物安全櫃中的過濾器，隻需根據實際使用情況，定期（半年至一年）更換初效濾網即可。

使用消毒液消毒，時間30 min左右即可；若使用的消毒液存在腐蝕性，應在消毒完成後使用無菌水將消毒液擦拭幹淨。使用臭氧或紫外燈的消毒時間一般也是30 min。

如果需要檢測泄漏至空氣中的CO₂濃度，防止其濃度過高可能引發的窒息風險，可以使用專(zhuan) 門的CO₂濃度檢測儀(yi) ，或者使用氧氣濃度監測儀(yi) （適用於(yu) 多種氣體(ti) 環境，如含CO₂或氮氣的）。

如果是要檢測管道泄漏的位置，初步的檢查方法可以是使用肥皂水在管道的接頭位置進行塗抹，觀察是否出現氣泡；如需要準確檢測，則需專(zhuan) 業(ye) 人員使用專(zhuan) 業(ye) 檢測工具進行檢測。

實驗服在清洗完成之後，可以放在專(zhuan) 用的滅菌袋中，再放進高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌處理。滅菌完成後，將實驗服連同滅菌袋一起放入烘箱中烘幹備用。

臭氧消毒適用於(yu) 配套有新風係統的實驗室。臭氧一般需要通過新風係統進入實驗室空間，並在空間內(nei) 達到一定濃度才能起到較好的消毒效果。消毒完成之後，也需要通過新風係統將殘留的臭氧排出實驗室，否則會(hui) 對實驗室環境產(chan) 生影響。

細胞狀態不好的因素有很多，首要且關(guan) 鍵的一步是排除汙染因素。如果通過各種檢測手段（細菌、真菌通過瓊脂板或空培檢測，支原體(ti) 使用試劑盒檢測）都無法檢測到汙染，則可能不是因汙染導致的。

如果仍懷疑存在汙染，可以嚐試向培養(yang) 物中添加適當濃度的廣譜抗生素。如果添加抗生素後細胞狀態明顯好轉，說明確實存在某種難以檢測的微生物影響細胞狀態；如果添加抗生素後細胞狀態未出現好轉甚至更差，則需從(cong) 其他方麵排查細胞狀態不好的原因，如培養(yang) 基成分、培養(yang) 條件、細胞特性或外部操作因素等。