常用的培養基耗材和細胞接種量

我們(men) 常用的細胞培養(yang) 容器有T25培養(yang) 瓶、10cm培養(yang) 皿、多孔板等，尤其是是多孔板，需要加多少培養(yang) 基，很多同學不太確定，下麵小編為(wei) 大家整理了常見的培養(yang) 容器的加液體(ti) 積和建議接種量：耗材名稱規格培養(yang) 麵積(cm^2)加液體(ti) 積（ml）建議接種量(×10^6）T25培養(yang) 瓶底麵積25cm^22551.25T75培養(yang) 瓶底麵積75cm^27515~303.75T175培養(yang) 瓶底麵積175cm^217535~408.756cm培養(yang) 皿直徑6cm21.251.0610cm培養(yang) 皿直徑10cm60.88~1...

查看詳情>>

大鼠骨髓間充質幹細胞該如何保存和應用？

大鼠骨髓間充質幹細胞是哺乳動物骨髓基質中發現的一種細胞亞(ya) 群，具有多種分化潛能，可分化為(wei) 骨、軟骨、脂肪、神經和成肌細胞。它們(men) 不僅(jin) 機械地支持骨髓中的造血幹細胞(HSC)，而且還分泌多種生長因子（如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF）來支持造血。在骨髓間充質細胞的原代培養(yang) 過程中，可在約24小時內(nei) 發生貼壁生長。細胞呈圓形、梭形和三角形，生長緩慢。液體(ti) 交換後細胞增殖明顯，呈梭形為(wei) 主，形態多樣。70%-80%可在10-14天融合，達到通過標準。傳(chuan) 代細胞形狀單一，有紡錘形或扁...

查看詳情>>

普諾賽4月直播答疑：常見細胞汙染類型及解決方法

在4月28日開播的“常見細胞汙染類型及解決(jue) 方法”課程中，有很多老師就細胞汙染提出了疑問。我們(men) 篩選出部分代表性問題，並作了詳細解答。01Q：在細胞培養(yang) 液中，有種可以遊動的蟲子是什麽(me) 汙染？A：是細菌汙染。帶鞭毛的細菌就是會(hui) 遊動的。02Q：有很多黑點，在原位顫抖，沒那麽(me) 明顯的定向運動，是什麽(me) 汙染？A：細胞碎片、血清沉澱和有些細菌汙染，都會(hui) 在原位顫抖。前者是原地做不規律的布朗運動，細菌是原地轉動，頻率會(hui) 高很多。03Q：血清的絮狀物雜質屬於(yu) 正常現象嗎？A：血清裏麵有一些大分子蛋白和一些...

查看詳情>>

SH-SY5Y收貨常見問題及解決方案

常溫運輸過程中，細胞不免受到震蕩和溫度變化的影響，出現皺縮、聚團甚至脫落的現象。遇到這種情況，不用緊張，隻要正確處理，細胞就能恢複正常生長。收貨時皺縮常溫細胞收貨後，把細胞放進細胞培養(yang) 箱靜置2-4小時即可。如果4小時後細胞仍然沒有鋪展開，密度適中的前提下可以靜置過夜（過夜前倒出部分培養(yang) 基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰鬆）。收貨時聚團常溫細胞收貨後，先把細胞放進細胞培養(yang) 箱靜置2-4小時以穩定狀態，再進行傳(chuan) 代。傳(chuan) 代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。收貨時脫落常...

查看詳情>>

細胞培養中常見細胞汙染類型及預防辦法

凡混入細胞培養(yang) 環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為(wei) 汙染，細胞汙染不能*被消除，但能減少其發生的頻率和後果的嚴(yan) 重性。本文將簡要介紹幾種常見的細胞汙染類型及處理方法。常見汙染類型細菌汙染特征：大小在0.5~5μm，比動物細胞小很多。多呈球狀或杆狀，形態規則，分布均勻；增殖速度快，一般汙染後48~72小時爆發式增殖；營養(yang) 消耗快，培養(yang) 基很快變黃，變渾濁；鏡下觀察有明顯的定向運動。處理方法：輕度汙染可用10X雙抗清洗處理，重度汙染建議消殺後丟(diu) 棄。真菌汙染特征：呈鏈球狀...

查看詳情>>

大鼠海馬神經元細胞培養和傳代流程

體(ti) 外培養(yang) 大鼠海馬神經元細胞細胞周期有限；建議使用與(yu) procell配套的專(zhuan) 用生長培養(yang) 基和正確的操作方法進行培養(yang) ，以保證細胞處於(yu) 理想培養(yang) 狀態。procell實驗室分離的大鼠海馬神經元細胞采用胰蛋白酶消化、神經元特異性培養(yang) 基培養(yang) 、篩選結合化學試劑抑製製備。細胞總數約為(wei) 5×105個(ge) 細胞/瓶。大鼠海馬神經元細胞培養(yang) 和傳(chuan) 代流程（請嚴(yan) 格按照無菌操作）：1、從(cong) 原培養(yang) 瓶中吸出培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液潤濕細胞兩(liang) 次，加入2-3ml025%胰蛋白酶消化細胞（注意消化時間，一般控製在1-2min內(nei) ）；2...

查看詳情>>

收到293 [HEK-293]細胞後如何操作？

293[HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞，293[HEK-293]細胞包含並表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出，293[HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(ce) 端和右側(ce) 端的DNA，但是現在明確了隻存在其左側(ce) 端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發現，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293[HEK-293]細胞19號染色體(ti) (19q13.2)。293[HEK-293]細胞為(wei) 人類腺病毒載體(ti) 擴增的宿主...

查看詳情>>

直播答疑 | 普諾賽3月直播：星空体育平台官网网址由來及鑒定問題

在普諾賽3月30日開播的細胞培養(yang) 直播課堂中，有很多同學提出各種疑問。我們(men) 篩選出具有代表性的問題，並作了詳細解答。01動物細胞怎麽(me) 鑒定？要根據實驗的目的以及細胞類型進行選擇。如果是人源星空体育平台官网网址，並且有文獻或數據庫公布對應細胞信息，則進行STR鑒定即可；如果使非人源的星空体育平台官网网址，可以進行種屬鑒定，並且附加一個(ge) 研究方向相關(guan) 的指標進行驗證，部分小鼠細胞也可以做STR鑒定，但目前數據庫不*，很多都沒有匹配數據。對於(yu) 原代細胞，如果能夠確保取材無誤，僅(jin) 進行特異性指標方麵的檢測就可以了，方法可采用...

查看詳情>>