如何避免胎牛血清沉澱物的產生

胎牛血清中可能出現的沉澱物是什麽(me) ？①纖維蛋白，它是經常出現的較大的沉澱物，可以達到1-2mm，可以用肉眼觀察到。②磷酸鈣，它也是常見的一種沉澱物，通常會(hui) 使血清出現渾濁，並且在37℃培養(yang) 的時候會(hui) 增加。這種沉澱物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點，這些小黑點由於(yu) 布朗運動看上去可以活動，因此經常被誤認為(wei) 是微生物汙染。③膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質，它們(men) 也是血清中出現沉澱物的常見原因。關(guan) 於(yu) 細胞生長，我們(men) 的試驗以及經驗表明沉澱物不會(hui) 影響細胞培養(yang) ，我們(men) 的客戶以及其它血清生產(chan) 商也證明了這一點。那...

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細胞的凍存與複蘇

一、程序凍存步驟（需梯度降溫）1、配置凍存液，凍存液推薦配比：55%（基礎培養(yang) 基）+40%(血清)+5%（DMSO）或90%胎牛血清+10%DMSO；推薦使用Procell通用血清型程序凍存液，貨號PB180436；2、製備好的細胞懸液計數，計算總細胞量；3、細胞離心後盡量吸幹淨上清，離心轉速1200rpm（250g）3min；4、加入配置好的凍存液重懸，調整細胞濃度為(wei) 3×106~1×107cells/mL；5、分裝入凍存管，一個(ge) 凍存管分裝1~1.5毫升；6、推薦使用程序降溫...

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原代細胞的取材和分離方法

將動物機體(ti) 的各種組織從(cong) 機體(ti) 中取出，經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養(yang) 基中培養(yang) ，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養(yang) 。原代細胞培養(yang) 的步驟一般是：取材→分離→培養(yang) 和維持，今天我們(men) 重點介紹原代細胞的取材和分離方法。一、取材人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yang) 成功的首要條件，直接影響細胞的體(ti) 外培養(yang) 。取材的基本要求：①取材要注意新鮮和保鮮②應嚴(yan) 格無菌③防止機械損傷(shang) ④去除無用組織和避免幹燥⑤應注意組織類型、分化程度、年齡等⑥作...

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原代細胞的複蘇步驟

細胞一般儲(chu) 存在液氮中,溫度達196°C,理論上儲(chu) 存時間是無限的。細胞凍存及複蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以zuida限度的保存細胞活力。細胞複蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細胞恢複到一般的生長狀態,今天我們(men) 來看看原代細胞的複蘇步驟。一、檢查收到細胞株包裹時,請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形,若有請立即處理告訴寄方。細胞株請盡速開始培養(yang) ,或立即冷凍保存(置於(yu) -70。C,隔夜後,移到iqN2)。二、冷凍細胞解凍1、依據細胞株說明書(shu) zhiding的基礎培養(yang) 基種類、血清...

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原代細胞傳代方法哪有幾種?

原代細胞是指從(cong) 機體(ti) 的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個(ge) 細胞並在體(ti) 外進行模擬機體(ti) 培養(yang) 的細胞,稱為(wei) 原代細胞。-般認為(wei) ,培養(yang) 的原代的第1代細胞和傳(chuan) 代到第10代以內(nei) 的細胞統稱為(wei) 原代細胞培養(yang) 。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳(chuan) 代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞I程等問題的研究。那麽(me) 關(guan) 於(yu) 原代細胞的傳(chuan) 代培養(yang) ,我們(men) 應該怎麽(me) 做呢?一般有以下兩(liang) 種方法:一、貼壁細胞的消化法傳(chuan) 代1、吸除或倒掉瓶內(nei) 舊培養(yang) 液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與(yu) ED...

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